小鼠胎鼠海马神经元的原代培养

1、取怀孕18天小鼠，采用颈椎脱臼法处死，75%乙醇全身浸泡消毒；

2、超净台内，无菌条件下取胚胎，放入解剖液中清洗3次；

3、分离海马脑区，解剖液冲洗3次；

4、用弹簧剪将海马剪成1mm³大小，消化液37℃消化15-20min，每五分钟振荡一次；

5、去掉上清，加入种植液1终止消化，吹打10-15次，不能有气泡，70um滤网过滤；

6、计数；

7、按4 x 10^4 细胞/孔种入24孔板，37℃，5%CO2，95%饱和湿度的培养箱中培养5h；

8、5h后更换为种植液2继续培养；

9、代表性结果。